國(guó)產(chǎn)凱氏定氮儀是利用凱氏定氮法對(duì)物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定的專用儀器。凱氏定氮儀按其配置分,可以分為全自動(dòng)凱氏定氮儀和半自動(dòng)定氮儀。其中全自動(dòng)凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置。凱氏定氮儀操作時(shí)可以分為人工模式和自動(dòng)模式,不同的實(shí)驗(yàn)者,可以根據(jù)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的熟練程度,自由選擇哪種方式。
國(guó)產(chǎn)凱氏定氮儀工作時(shí)向樣品中參加濃硫酸和催化劑,充沛混勻,然后加熱消化分化,樣中碳和氫被氧化成二氧化碳和水,其間的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸規(guī)范滴定溶液滴定,依據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),即為蛋白質(zhì)的含量。
濃硫酸具有脫水性和氧化性,可使有機(jī)物中的碳、氫被氧化為二氧化碳和水,蛋白質(zhì)會(huì)分化為氨,然后氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。一般參加硫酸鉀和硫酸銅作為催化劑來(lái)加速蛋白質(zhì)分化。硫酸鉀能夠行進(jìn)溶液的沸點(diǎn),一般情況下,純硫酸的沸點(diǎn)在340℃左右,可是在添加硫酸鉀后,可行進(jìn)至400℃以上。
行進(jìn)溫度使有機(jī)物加速分化??墒遣荒軈⒓舆^(guò)多的硫酸鉀,不然會(huì)因?yàn)闇囟冗^(guò)高,使生成的硫酸銨發(fā)生熱分化成氨而構(gòu)成丟掉。硫酸銅除作為催化劑外,還能夠指示消化完畢的抵達(dá),有機(jī)物悉數(shù)消化完后,溶液呈現(xiàn)清澈的藍(lán)綠色,硫酸銅還能夠做蒸餾時(shí)堿性反響的指示劑。
國(guó)產(chǎn)凱氏定氮儀使用前,微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌,以除去管道內(nèi)可能殘留的氨,正在使用的儀器,每次測(cè)樣前,蒸氣洗滌5min即可。較長(zhǎng)時(shí)間未使用的儀器,重復(fù)蒸氣洗滌,不得少于三次,并檢查儀器是否正常。仔細(xì)檢查各個(gè)連接處,保證不漏氣。這樣,一方面保證了儀器的清潔,另一方面,也同時(shí)對(duì)儀器進(jìn)行了檢查,一些壞的零部件,可以及時(shí)被查出并替換。